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如何检测甲醛是否反弹

2019-08-26

甲醛(FA)是一种工业化工产品,广泛用于建筑材料和家居产品的生产,在室内环境中有多种来源释放,如刨花板、家居产品、[1]胶合板等;因此,大量的工人和居民不可避免地接触到FA[2]。初步研究表明,气态FA可导致致癌和胎儿异常[3],临床和流行病学调查发现,与工作相关的FA暴露可导致头痛、焦虑、疲劳、睡眠障碍,尤其是认知障碍[4,5]。此外,动物实验结果一致显示,暴露于气态FA会导致异常行为,包括空间记忆缺失[6-8]。
 
 
 
有趣的是,在暴露于外源性FA[9]的人类中,以及在老年小鼠和大鼠中,在患有认知障碍[11]的健康老年人中,以及在患有阿尔茨海默病(AD)[12]的患者中,都检测到了内源性FA的异常水平。文献证据表明,在动物模型中直接在脑室内注射过量的FA会导致中枢神经系统的损伤,特别是显著的记忆损伤[13-16]。这些数据有力地支持了海马体中FA过多会导致认知缺陷的观点。
 
 
 
鉴于FA的神经毒性作用,已经开发了多种分析方法来检测动物组织中的FA。最早测定脑组织中FA (~ 0.16-0.24 ?mM)的方法为气相色谱-质谱联用(GC-MS)[17]法。另一种灵敏的检测肝脏中FA的方法是利用高效液相色谱法和紫外检测器(HPLC-UV)[18,19]。最近,使用高效液相色谱荧光检测器(HPLC-Fluo),我们发现有0.25-0.32 ?mfa在正常成年小鼠和大鼠海马中的表达。虽然现有的方法为脑内FA的检测提供了一些准确、超灵敏的检测方法,但由于费用昂贵、实验步骤复杂、分析试剂有毒等缺点,限制了其实际应用。因此,需要一种简单、灵敏、高效的测定生物样品中微量FA的方法。
 
 
 
在此,我们报告一个高度敏感的和有选择性的分光光度法检测FA小鼠的大脑中已经建立了在室温下用无色试剂——4-amino-3-penten-2-one (Fluoral-P)有选择地与足总反应生成有色化合物,3,5-diacetyl-1, 4-dihydrolutidine (DDL)。因此,改进的荧光- p法适用于脑FA的检测和FA神经毒性的评估。
 
 
 
至:
 
2. 材料和方法
 
2.1。试剂和化学FA溶液
 
37% (w / v);(美国,圣路易斯);4-氨基-3-戊-2- 1(氟-p, CAS: 1118-66-7)。http://TCIchemicals.com、日本);盐酸(HCl, 1?N, Sigma-Aldrich, Saint Louis, USA);氢氧化钠(NaOH, 2?N, Sigma-Aldrich);二甲基亚砜(DMSO, Sigma-Aldrich,美国圣路易斯);三氯乙酸(TCA, Sigma-Aldrich, Saint Louis, USA);去离子水(毫q水);磷酸盐缓冲盐水(PBS, 1?(1 .北京化工大学化学系;2 .北京化工大学化学系;采用生理盐水(NS,北京化工大学,中国)进行研究。
 
 
 
2.2。设备
 
冰箱(海尔集团,北京,中国);pH计(上海仪器电气科学仪器股份有限公司pH - 3c);可调高速均质器(常州良优实验仪器厂FSH-2A);型号ZD2011584,来自加拿大安大略省Nepean的Millipore公司;SP-Max 2300A多光谱微板分光光度计(上海生物科技有限公司闪光光谱,上海);采用Morris water maze(上海生物威尔有限公司,上海)进行研究。
 
 
 
2.3。化学溶液的制备
 
FA库存解决方案(100?mM, 12.3?mL): FA溶液(0.1?mL, 37%)被导入12.2?mL PBS (1?pH值分别为4.0、5.0、6.0、7.0、resp.)。FA工作液分别为0.001、0.01、0.1、1、10?mM、pH值分别为4.0、5.0、6.0和7.0。氟磷贮存液(500?mM): 0.05?g在1中溶解?mL DMSO,置于4℃冰箱中保存不超过2个月。氟磷工作液分别为0.5、5和50?mM、pH值分别为4.0、5.0、6.0和7.0。在PBS (1?在黑暗中保存。
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